{"id":2464,"date":"2020-04-27T02:01:16","date_gmt":"2020-04-27T01:01:16","guid":{"rendered":"http:\/\/oxfordbrazilebm.com\/?page_id=2464"},"modified":"2020-04-27T02:07:34","modified_gmt":"2020-04-27T01:07:34","slug":"testes-moleculares-e-de-anticorpos-no-local-de-atendimento-para-apoiar-o-rastreamento-diagnostico-e-monitoramento-da-covid-19","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/oxfordbrazilebm.com\/index.php\/testes-moleculares-e-de-anticorpos-no-local-de-atendimento-para-apoiar-o-rastreamento-diagnostico-e-monitoramento-da-covid-19\/","title":{"rendered":"Testes moleculares e de anticorpos no local de atendimento para apoiar o rastreamento, diagn\u00f3stico e monitoramento da COVID-19"},"content":{"rendered":"

[vc_row][vc_column][vc_column_text]Tradutores:\u00a0Paulo Nadanovskyy, Rachel Riera<\/p>\n

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S\u00e3o descritos onze testes diagn\u00f3sticos para COVID-19<\/strong> no local de atendimento: seis testes moleculares e cinco testes baseados em anticorpos. Alguns mostram alta acur\u00e1cia diagn\u00f3stica durante testagem controlada, mas dados de desempenho em ambientes cl\u00ednicos, e uma compreens\u00e3o do papel ideal para estes testes no manuseio cl\u00ednico do paciente, ainda est\u00e3o faltando.<\/strong><\/p>\n

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K Green, S Graziadio, P Turner, T Fanshawe, J Allen<\/p>\n

7 de abril de 2020<\/p>\n

Kile Green1<\/sup>, Sara Graziadio2<\/sup>, Philip Turner3,4<\/sup>, Thomas Fanshawe3,4<\/sup>, Joy Allen1<\/sup><\/p>\n

Em nome do time Oxford COVID-19 Evidence<\/p>\n

Centro de Medicina Baseada em Evid\u00eancias, Nuffield Department of Primary Care Health Sciences<\/p>\n

Universidade de Oxford<\/p>\n

1<\/sup>NIHR Newcastle In Vitro Diagnostics Co-operative<\/p>\n

Newcastle University, Newcastle upon Tyne, NE2 4HH<\/p>\n

2<\/sup>NIHR Newcastle In Vitro Diagnostics Co-operative<\/p>\n

Newcastle upon Tyne NHS Hospitals Foundation Trust, Newcastle upon Tyne, NE1 4LP<\/p>\n

3<\/sup>NIHR Community Healthcare MedTech and In Vitro Diagnostics Co-operative, Oxford Health NHS Foundation Trust<\/p>\n

4<\/sup>Nuffield Department of Primary Care Health Sciences, University of Oxford, OX2 6GG<\/p>\n

Correspond\u00eancia para joy.allen@newcastle.ac.uk<\/a><\/p>\n

PDF Testes \u2018point-of-care\u2019 moleculares e de anticorpos para apoiar a triagem, diagn\u00f3stico e monitoramento da COVID-19 <\/a><\/p>\n

PDF Tabelas testes de point-of-care para \u00a0COVID-19 <\/a><\/p>\n

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PARECER<\/strong><\/p>\n

Levar os testes diagn\u00f3sticos para a COVID-19 de ambientes laboratoriais para o local do atendimento de pacientes tem potencial transformador na taxa e na quantidade de testes que poderiam ser realizados. Onze testes diagn\u00f3sticos que s\u00e3o potencialmente adequados para testar a COVID-19 no local de atendimento s\u00e3o descritos: seis testes moleculares e cinco testes baseados em anticorpos. Alguns deles mostram alta acur\u00e1cia diagn\u00f3stica durante testagens controladas, mas os dados de desempenho em ambientes cl\u00ednicos, e uma clara compreens\u00e3o da popula\u00e7\u00e3o \u00f3tima e do papel desses testes no manuseio cl\u00ednico do paciente, ainda est\u00e3o faltando.<\/p>\n

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CONTEXTO<\/strong><\/p>\n

A necessidade de aumentar os n\u00edveis de testagens para a COVID-19 foi identificada tanto pela Organiza\u00e7\u00e3o Mundial de Sa\u00fade quanto pelo \u00a0governo do Reino Unido<\/a>.<\/p>\n

Atualmente, a maioria dos testes da COVID-19 \u00e9 realizada em ambiente laboratorial. Orienta\u00e7\u00e3o para testes do v\u00edrus em laborat\u00f3rios do NHS est\u00e1 dispon\u00edvel aqui<\/a>, e a OMS tamb\u00e9m fornece orienta\u00e7\u00e3o t\u00e9cnica para testes laboratoriais<\/a>. Uma compara\u00e7\u00e3o de swabs orofar\u00edngeos e nasofar\u00edngeos para diagn\u00f3stico laboratorial j\u00e1 foi relatada anteriormente<\/a>.<\/p>\n

Testes realizados no local de atendimento, com boa acur\u00e1cia e escalon\u00e1veis para o diagn\u00f3stico da COVID-19 aumentariam o escopo para que o diagn\u00f3stico pudesse ser feito na comunidade e fora do ambiente laboratorial (Wang et al<\/a>\u00a0(1), Nguyen et al<\/a> (2)). Eles teriam o potencial de reduzir o tempo para obten\u00e7\u00e3o de um resultado \u00fatil, poderiam apoiar a identifica\u00e7\u00e3o precoce daqueles com COVID-19 e tamb\u00e9m poderiam apoiar o uso adequado de recursos de isolamento, medidas de controle de infec\u00e7\u00e3o e recrutamento para ensaios cl\u00ednicos de tratamentos.<\/p>\n

Neste relato, n\u00f3s resumimos as caracter\u00edsticas dos atuais testes de diagn\u00f3stico molecular e de anticorpos dispon\u00edveis para apoiar o diagn\u00f3stico e o manejo de pacientes com suspeita de COVID-19. N\u00f3s consideramos an\u00e1lises que poderiam ser realizadas em aparelhos pr\u00f3ximos ao paciente, ao inv\u00e9s daqueles que normalmente seriam feitos dentro de um laborat\u00f3rio. Muitos destes testes realizados no local de atendimento s\u00e3o testes do tipo PCR de base molecular, mas outros s\u00e3o an\u00e1lises sorol\u00f3gicas, que detectam a presen\u00e7a de anticorpos em uma amostra de sangue.<\/p>\n

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Teste de refer\u00eancia<\/strong><\/p>\n

O teste de refer\u00eancia atual para diagn\u00f3stico de infec\u00e7\u00e3o ativa pelo SARS-CoV-2 \u00e9 o ensaio de rea\u00e7\u00e3o em cadeia da polimerase \u2013 transcriptase reversa (rRT-PCR) em tempo real (Corman et al<\/a>\u00a0(3)). O ensaio rRT-PCR utiliza RNA viral extra\u00eddo de amostras de pacientes (por exemplo, material coletado por swab<\/em> naso\/orofar\u00edngeo), sintetiza DNA complementar (cDNA) atrav\u00e9s da a\u00e7\u00e3o da enzima de transcriptase reversa, e amplifica sequ\u00eancias alvo do genoma viral do modelo de cDNA. O rRT-PCR pode ser interpretado de forma semi-quantitativa, com a velocidade de amplifica\u00e7\u00e3o do alvo dependente da concentra\u00e7\u00e3o e qualidade do RNA viral na amostra inicial, e assim a taxa de amplifica\u00e7\u00e3o pode ser usada como um modelo para a carga viral da amostra.<\/p>\n

A falha na amplifica\u00e7\u00e3o pode ser interpretada como um resultado negativo, mas tamb\u00e9m pode ser atribu\u00edvel \u00e0 m\u00e1 qualidade da amostra cl\u00ednica ou ao estado inicial da doen\u00e7a. Estes testes podem ser realizados em termocicladores padr\u00e3o rRT-PCR ou em grandes plataformas de diagn\u00f3stico automatizadas ou semi-automatizadas. Os testes em pessoas com suspeita de COVID-19 incuem o envio de uma amostra respirat\u00f3ria (por exemplo, swab oro\/nasofar\u00edngeo, expectora\u00e7\u00e3o ou lavado broncoalveolar em pacientes gravemente doentes) para um laborat\u00f3rio de refer\u00eancia para testes de rRT-PCR. O tempo entre a coleta da amostra e a gera\u00e7\u00e3o dos resultados pode variar de 24 a 72 horas, mas pode ser muito mais r\u00e1pido com uma abordagem simplificada entre da amostragem at\u00e9 o resultado em cen\u00e1rios cl\u00ednicos urgentes.<\/p>\n

Os testes moleculares realizados no local de atendimento utilizam a mesma metodologia b\u00e1sica da an\u00e1lise laboratorial, mas essencialmente automatizam um n\u00famero vari\u00e1vel de etapas necess\u00e1rias. Como eles poderiam ser realizados em ambientes pr\u00f3ximos ao paciente ao inv\u00e9s de realizados no laborat\u00f3rio, espera-se que eles ofere\u00e7am um tempo menor para o resultado.<\/p>\n

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Testes sorol\u00f3gicos e antig\u00eanicos<\/strong><\/p>\n

Testes sorol\u00f3gicos<\/a>, utilizando ensaios imunoenzim\u00e1ticos, detectam a presen\u00e7a de anticorpos para coronav\u00edrus em uma amostra de sangue total, plasma ou soro (Xiao et al<\/a>\u00a0(4)). Estes testes detectam imunoglobulinas M e G (IgM e IgG). A IgM \u00e9 a maior imunoglobulina, e \u00e9 a primeira a aparecer ap\u00f3s a exposi\u00e7\u00e3o inicial a um ant\u00edgeno. IgG \u00e9 o anticorpo mais comum encontrado no corpo, que aparecer\u00e1 mais tarde, mas ser\u00e1 gerado em abund\u00e2ncia. Estes testes podem determinar se um paciente foi previamente infectado com coronav\u00edrus, pois eles permanecer\u00e3o positivos ap\u00f3s a infec\u00e7\u00e3o ativa ter desaparecido.<\/p>\n

Atualmente, testes sorol\u00f3gicos n\u00e3o s\u00e3o oferecidos rotineiramente como parte de rastreamento ou diagn\u00f3stico da COVID-19, pois n\u00e3o h\u00e1 an\u00e1lises validadas dispon\u00edveis. Estes testes n\u00e3o ser\u00e3o positivos at\u00e9 que o organismo tenha produzido anticorpos para combater o v\u00edrus, normalmente 5 a 10 dias p\u00f3s-infec\u00e7\u00e3o. O uso generalizado de tal teste poderia revelar qual o percentual da popula\u00e7\u00e3o j\u00e1 teve o v\u00edrus, mas estes testes t\u00eam menor probabilidade de detectar casos nos est\u00e1gios iniciais da doen\u00e7a. Nos casos em que o teste molecular for negativo, mas houver uma forte suspeita cl\u00ednica de doen\u00e7a COVID-19, os testes sorol\u00f3gicos podem apoiar um diagn\u00f3stico uma vez que an\u00e1lises validadas estejam dispon\u00edveis.<\/p>\n

Os testes de ant\u00edgenos (Khan et al<\/a> (5)) tamb\u00e9m podem oferecer informa\u00e7\u00f5es adicionais antes ou no momento da coleta de uma amostra para triagem molecular, mas n\u00e3o h\u00e1 testes de ant\u00edgenos para COVID-19 comercialmente dispon\u00edveis no momento da reda\u00e7\u00e3o deste documento.<\/p>\n

Para uma vis\u00e3o mais detalhada dos m\u00e9todos laboratoriais relevantes, veja Loeffelholz & Tang<\/a>\u00a0(6).<\/p>\n

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EVID\u00caNCIA ATUAL<\/strong><\/p>\n

N\u00f3s acessamos os sites listados na Estrat\u00e9gia de Busca (abaixo) em 26\/03\/2020 e extra\u00edmos a lista de testes realizados no local de atendimento dispon\u00edveis.<\/p>\n

N\u00f3s registramos as seguintes informa\u00e7\u00f5es conforme obtidas nos sites dos fabricantes e bulas nas caixas dos testes. N\u00f3s tamb\u00e9m tentamos obter informa\u00e7\u00f5es sobre a performance diagn\u00f3stica entrando em contato diretamente com os fabricantes, mas como pouca informa\u00e7\u00e3o extra foi obtida, relatamos aqui apenas as informa\u00e7\u00f5es dispon\u00edveis ao p\u00fablico.<\/p>\n